Celúla

May 26, 2023

CBA mostró mayor precisión diagnóstica que otras dos pruebas de anticuerpos

por Lindsey Shapiro, PhD | 31 de agosto de 2023

Un ensayo basado en células para detectar anticuerpos que causan miastenia gravis (MG) en la sangre da como resultado una mayor precisión diagnóstica que otras dos pruebas de anticuerpos, según datos de un estudio realizado en China.

El ensayo basado en células (CBA) fue superior al ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas (ELISA) y al ensayo de radioinmunoprecipitación de radioactividad (RIPA) para detectar anticuerpos contra el receptor de acetilcolina (AChR), que están presentes en aproximadamente el 85% de los pacientes con MG.

También fue superior, pero en menor medida, en la detección de anticuerpos contra la quinasa específica del músculo (MuSK), que se encuentra en aproximadamente el 6% de los pacientes.

El estudio, “Un estudio multicéntrico, prospectivo y doble ciego que compara la precisión de los ensayos de diagnóstico de autoanticuerpos en la miastenia gravis: el estudio SCREAM”, se publicó en The Lancet Regional Health.

La MG, una enfermedad autoinmune, se caracteriza por la producción de anticuerpos autorreactivos que atacan por error a proteínas importantes para la unión neuromuscular, el punto de contacto cercano entre los nervios y los músculos donde se comunican. AChR y MuSK son los objetivos más comunes de los anticuerpos autorreactivos que impulsan la MG.

Los análisis de sangre para medir los niveles de estos anticuerpos son parte integral del diagnóstico y seguimiento de la MG.

A lo largo de los años se han desarrollado varios tipos de ensayos con capacidad para medir anticuerpos dirigidos a AChR y MuSK, pero falta evidencia de alta calidad sobre cuáles son los más precisos y eficaces.

"Esto puede afectar la precisión en la toma de decisiones clínicas en todos los centros, lo que resulta en un desafío para los neurólogos que tratan a pacientes con MG y realizan ensayos clínicos", escribieron los investigadores.

Como tal, un equipo de científicos en China llevó a cabo un ensayo clínico (NCT05219097) para comparar la sensibilidad y especificidad de tres pruebas disponibles comercialmente para detectar anticuerpos que causan MG.

Aquí, la sensibilidad de una prueba se refería al porcentaje de pacientes con MG identificados correctamente (tasa de verdaderos positivos), mientras que su sensibilidad se refería al porcentaje de casos no afectados que se descartaban correctamente (tasa de verdaderos negativos).

Se reclutó a un total de 2272 personas con sospecha de MG en nueve centros de China entre enero de 2021 y septiembre de 2022 y se evaluó la afección mediante una serie de evaluaciones clínicas realizadas por dos neurólogos consultores.

Finalmente, 2.043 personas (89,9%) fueron diagnosticadas con MG: 1.100 con enfermedad generalizada y 993 con forma ocular. De las 229 personas sin MG, casi tres cuartas partes (73,4%) fueron diagnosticadas con otras afecciones, mientras que 61 fueron consideradas sanas.

Se recolectaron muestras de sangre de cada persona y se sometieron a pruebas de anticuerpos mediante CBA, RIPA y ELISA.

CBA implica observar directamente las interacciones entre los anticuerpos en muestras de sangre y sus proteínas diana (unidas a una molécula fluorescente) en la superficie de células cultivadas en laboratorio en una placa de Petri. Los otros enfoques normalmente analizan las interacciones anticuerpo-objetivo sin el uso de células y mediante marcaje con enzimas (ELISA) o moléculas radiactivas (RIPA).

En general, se detectaron anticuerpos anti-AChR en aproximadamente 1.280-1.478 de los 2.043 pacientes con MG en las pruebas y se encontraron anticuerpos anti-MuSK en 50-59 pacientes, siendo CBA el que mostró los números de detección más altos.

Los resultados mostraron que el CBA registró la mayor sensibilidad para los anticuerpos anti-AChR (72,3%), seguido de RIPA (64,1%) y ELISA (62,7%). Entre las 1.478 muestras que resultaron positivas para estos anticuerpos mediante CBA, solo alrededor del 80% fueron clasificadas como positivas por RIPA (86,3%) y ELISA (84,6%).

CBA también fue superior a las otras dos pruebas para detectar anticuerpos anti-MuSK entre pacientes con MG (2,9% frente a 2,6% con ELISA y 2,4% con RIPA).

Los tres métodos dieron como resultado un número bajo de falsos positivos entre personas sin MG, y se asociaron con una especificidad de más del 94 % para los anticuerpos anti-AChR y superior al 99 % para los anticuerpos anti-MuSK. Aquí, tanto CBA como RIPA mostraron la mayor especificidad para ambos anticuerpos (97,8% -100%).

En general, la precisión diagnóstica del ACh basado en anticuerpos anti-AChR fue del 85,8%, significativamente mayor que la del RIPA (84,3%) o ELISA (80,9%). La precisión diagnóstica de CBA para anticuerpos MuSK fue del 51,4%, similar a la de RIPA (51,3%) y ELISA (50,5%).

"Este estudio proporciona evidencia de alto nivel que respalda el AChR como ensayo de primera línea en el diagnóstico y tratamiento de la MG, así como la evaluación de pacientes con sospecha de MG para quienes los anticuerpos AChR o MuSK son indetectables mediante ensayos RIPA o ELISA", escribieron los investigadores.

Aunque los anticuerpos anti-MuSK son el segundo tipo más común, siguen siendo bastante raros en comparación con los que actúan contra el AChR. Eso puede dificultar determinar la verdadera sensibilidad de una prueba para estos anticuerpos, anotaron los investigadores.

"Se justifica aumentar el tamaño de la muestra para este grupo particular de pacientes con MG para llegar a una conclusión definitiva sobre la superioridad entre los tres métodos probados", escribió el equipo.

Algunos pacientes sin MG, pero con otras enfermedades autoinmunes, dieron positivo en anticuerpos asociados a MG en múltiples pruebas. Los científicos creen que es poco probable que se trate de falsos positivos, sino que reflejan las tasas reales de estos anticuerpos en casos sin MG.

Ese hallazgo refuerza "la noción de que el diagnóstico definitivo de MG requiere manifestaciones clínicas junto con una batería de pruebas de laboratorio", escribió el equipo.